前言：本站為你精心整理了中藥對(duì)骨質(zhì)疏松影響范文，希望能為你的創(chuàng)作提供參考價(jià)值，我們的客服老師可以幫助你提供個(gè)性化的參考范文，歡迎咨詢。

【摘要】目的：研究中藥對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠骨骼肌形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響。方法：SD雌性大鼠去勢(shì)后，分為正常對(duì)照組（SHAM）、去卵巢手術(shù)組（OVX）、雌激素組(OVX+ES)、中藥組（OVX+TCD），SHAM組、OVX組予蒸餾水，OVX+TCD予骨康灌胃給藥，OVX+ES組給予尼爾雌醇灌胃，正常對(duì)照組給予蒸餾水灌胃。治療3個(gè)月后取左側(cè)骨直肌檢測(cè)。結(jié)果：各指標(biāo)中，去卵巢對(duì)照組與正常組比較均有顯著差異（P<0.01），表明骨質(zhì)疏松大鼠模型的骨骼肌存在著較明顯的退變。激素組能明顯增粗骨骼肌纖維（P<0.01），中藥組次之（P<0.05），且中藥組與激素組比較無(wú)顯著差異；激素組能使骨骼肌橫截面積及骨骼肌纖維周長(zhǎng)明顯增加（P<0.01），中藥組次之（P<0.05）；且中藥組與激素組均能明顯減少單位面積骨骼纖維數(shù)目（P<0.01）。結(jié)論：中藥骨康能夠提高骨骼肌纖維橫截面積、周長(zhǎng)，但其作用較雌激素弱。

【關(guān)鍵詞】骨質(zhì)疏松；中藥；骨骼；肌形態(tài)學(xué)；大鼠

骨折是骨質(zhì)疏松癥最為常見的繼發(fā)疾病，骨折后對(duì)運(yùn)動(dòng)能力、一般健康水平、社會(huì)行為能力、精神狀態(tài)等都有顯著的影響，甚至危及到生命。目前關(guān)于骨質(zhì)疏松性骨折的研究中，除了認(rèn)為骨質(zhì)量降低是骨折發(fā)生的主要原因外，骨骼肌的退變也逐漸被人們所認(rèn)識(shí)，在此次研究中我們觀察了中藥骨康對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠骨骼肌的作用，觀測(cè)肌形態(tài)學(xué)相關(guān)指標(biāo)，探討中藥在治療骨質(zhì)疏松癥過(guò)程中的多重作用。

1材料與方法

1.1藥物及試劑中藥骨康由淫羊藿、補(bǔ)骨脂、丹參、黃芪等10味中藥組成，其提取液含生藥量1.43g/mL，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬骨傷科醫(yī)院制劑室提供；尼爾雌醇片由上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：060702。

1.2動(dòng)物及分組選用6月齡健康雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠58只，體重260~290g，清潔級(jí)，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：2003A010。隨機(jī)抽取10只作動(dòng)物模型監(jiān)測(cè)，剩余48只隨機(jī)分為4組，分別為正常對(duì)照組（SHAM）、去卵巢手術(shù)組（OVX）、雌激素對(duì)照組（OVX+ES）、中藥組（OVX+TCD）。所有大鼠均在廣州中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心清潔級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室分籠飼養(yǎng)，相對(duì)濕度40%~70%，溫度18~29℃，空氣潔凈度100000級(jí)，菌落數(shù)≤12.2個(gè)/皿，噪音≤60dB，晝夜明暗交替時(shí)間12/12h。自由進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)飼料和飲用水。

1.3動(dòng)物模型制備按去卵巢骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型要求進(jìn)行手術(shù)動(dòng)物模型的制備[1]。用10%水合氯醛溶液按0.33mL/100g腹腔注射麻醉，俯臥位固定，在背部中1/3處剪毛，自腰椎背部中線向下作縱行切口長(zhǎng)2~3cm，沿肩胛線分別于兩側(cè)肋下剪開腰肌，可見位于腎臟外下方的卵巢及與其相連的子宮角，對(duì)10只抽檢大鼠和OVX組、OVX+ES組、OVX+TCD組的大鼠均行手術(shù)結(jié)扎并切斷子宮角，完整切除雙側(cè)卵巢，切口縫合，完成手術(shù)造模；SHAM組大鼠行假手術(shù)，采用同樣的麻醉和手術(shù)入路，找到卵巢后，切除卵巢附近的部分脂肪后即關(guān)閉。切除的組織交專人檢查以確保組織的完整性，并通過(guò)組織學(xué)檢測(cè)確實(shí)組織的正確性。術(shù)后所有大鼠按1.6萬(wàn)U/100g肌肉注射青霉素，每天1次，連續(xù)3d，防止術(shù)后感染。手術(shù)前、術(shù)后3月對(duì)抽檢大鼠分別采用DXA進(jìn)行全身骨密度測(cè)定，用于證實(shí)本次實(shí)驗(yàn)大鼠在切除卵巢術(shù)后3個(gè)月出現(xiàn)了骨質(zhì)疏松的改變，造模成功。

1.4治療方法手術(shù)后正常飼養(yǎng)3月后開始治療，治療時(shí)間為3個(gè)月。SHAM組、OVX組以蒸餾水10mL/kg灌胃，1次/d；OVX+TCD組按4.8g/kg骨康（相當(dāng)于臨床劑量的10倍），灌胃給藥，每天1次；OVX+ES組給予尼爾雌醇1mg/kg灌胃，使用前配成混懸液（濃度為0.167mg/mL），1次/周，正常對(duì)照組每天給予蒸餾水10mL/kg灌胃。

1.5取材方法實(shí)驗(yàn)過(guò)程中SHAM組12號(hào)、OVX+TCD組8號(hào)在進(jìn)行活體骨密度檢查時(shí)因麻醉過(guò)深死亡。剩余動(dòng)物采用斷頭處死的方法，在治療后3個(gè)月后全部處死。處死后取左側(cè)股直肌稱量濕重后，分別放入10%中性福爾馬林磷酸緩沖液中固定待行組織學(xué)檢測(cè)。

1.6實(shí)驗(yàn)指標(biāo)測(cè)試方法

斷頭處死大鼠，取出左側(cè)股直肌分別用電子天平稱量濕重后，再放入10%中性福爾馬林磷酸緩沖液中固定24h，用70%~100%各級(jí)酒精脫水，二甲苯透明兩次，浸蠟，石蠟包埋、切片（片厚約5m）、HE染色，封固好的切片置于20×20倍鏡下觀察骨骼肌組織形態(tài)變化[2，3]并照取圖像，經(jīng)由ImageProPlus5.0軟件測(cè)量骨骼肌纖維平均直徑、平均面積、周長(zhǎng)及單位面積下骨骼肌纖維數(shù)量（由于均采用了400×圖像，具備同樣放大率及標(biāo)尺，其數(shù)值結(jié)果即能進(jìn)行比較分析，所以未進(jìn)行實(shí)際單位換算）。

1.7統(tǒng)計(jì)方法全部計(jì)量資料采用x±s表示，統(tǒng)計(jì)處理軟件系統(tǒng)采用SPSS10.0。數(shù)據(jù)組間比較采用單因素方差分析（OnewayANOVA），造模手術(shù)前后數(shù)據(jù)采用自身配對(duì)T檢驗(yàn)，兩種數(shù)據(jù)的相關(guān)性采用相關(guān)性分析。

2結(jié)果

2.1各組大鼠骨骼肌的變化肉眼檢查：各組大鼠股直肌大小、形狀均正常，外膜光滑，未見滲出物，表面及切面未見出血點(diǎn)及壞死灶。鏡下觀察：各組肌組織排列結(jié)構(gòu)未見異常，間質(zhì)未見明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和血管增生。

2.2各組大鼠骨骼肌形態(tài)學(xué)指標(biāo)比較如表1、圖1所示，各指標(biāo)中，去卵巢對(duì)照組與正常組比較均有顯著差異（P<0.01），表明骨質(zhì)疏松大鼠模型的骨骼肌存在著較明顯的退變。在改善去卵巢大鼠骨骼肌纖維直徑方面，激素對(duì)照組能明顯增粗骨骼肌纖維（P<0.01），中藥組次之（P<0.05），且中藥組與激素對(duì)照組比較無(wú)顯著差異；在改善去卵巢大鼠骨骼肌橫截面積和骨骼肌纖維周長(zhǎng)方面，激素對(duì)照組能使骨骼肌橫截面積及骨骼肌纖維周長(zhǎng)明顯增加（P<0.01），中藥組次之（P<0.05）；在減少單位面積骨骼肌纖維的數(shù)目方面，中藥組與激素對(duì)照組均能明顯減少其數(shù)目（P<0.01）。

結(jié)果表明：中藥能夠在一定程度上改善骨骼肌的素質(zhì)，但在本研究中，其能力較雌激素弱。

3討論

如果不考慮性別、年齡和身高，局部肌肉強(qiáng)度是決定整個(gè)骨骼強(qiáng)度的重要因素[4]。在日常生活中骨骼最大的載荷來(lái)自肌肉的主動(dòng)收縮，研究顯示肌肉強(qiáng)度和肌肉含量與其附著骨骼的骨量呈正相關(guān)[2]。Frost[3]認(rèn)為，肌力決定骨結(jié)構(gòu)和骨量。張林提出[5]肌肉強(qiáng)度和骨強(qiáng)度具有緊密相關(guān)性，二者之間的比值處于恒定值，因此，如何保持肌肉強(qiáng)度，對(duì)控制后天的骨強(qiáng)度和骨量是十分重要的。童普德[6]提出：作為一個(gè)完整的運(yùn)動(dòng)功能單位，骨與肌肉是緊密聯(lián)系在一起的，肌力、肌組織質(zhì)量和BMD之間顯著相關(guān)，通過(guò)肌肉的收縮對(duì)骨產(chǎn)生應(yīng)力負(fù)荷，也是治療骨質(zhì)疏松癥的有效方法。另外，肌肉強(qiáng)度增加的同時(shí)，不僅改善了病人的平衡能力、動(dòng)作的敏捷度，從而預(yù)防跌倒，還能夠?yàn)楣趋老到y(tǒng)提供強(qiáng)有力的動(dòng)力系統(tǒng)，防止骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)的有害運(yùn)動(dòng)，在Anna[7]的研究中就提到，背肌肌力的增強(qiáng)，對(duì)老年婦女的駝背畸形有著明顯的預(yù)防作用，說(shuō)明在維持脊柱的正常結(jié)構(gòu)中有著非常重要的作用。骨骼肌衰弱是老年人常見的增齡性病癥。許多學(xué)者從不同角度探索了老年性骨骼肌衰弱的發(fā)病機(jī)理。絕大多數(shù)研究證實(shí)了增齡對(duì)老年人骨骼肌的運(yùn)動(dòng)單位募集水平、結(jié)構(gòu)及代謝功能都產(chǎn)生很大的影響。肌纖維蛋白的含量可以在一定程度反映肌纖維面積和肌肉力量，肌肉的抗氧化能力可反映出肌肉的衰老程度。形態(tài)學(xué)方面研究指出，老年人骨骼肌肌力下降與肌肉體積萎縮正相關(guān)。肌肉的組織學(xué)檢查能對(duì)肌肉的形狀、功能狀態(tài)作一基本了解。

本研究中，大鼠切除卵巢后，相對(duì)于未切除卵巢的大鼠，骨骼肌在組織形態(tài)學(xué)上發(fā)生了改變，主要表現(xiàn)在骨骼肌纖維直徑、橫截面積、周長(zhǎng)上的縮小，同時(shí)在單位面積上骨骼肌的數(shù)量是增大的，這些結(jié)果表明，大鼠經(jīng)去勢(shì)后，骨骼肌存在著明顯的萎縮現(xiàn)象，這樣的變化最終導(dǎo)致的結(jié)果是骨骼肌力量、耐力等的降低，削弱了肌系統(tǒng)的運(yùn)動(dòng)能力。而經(jīng)過(guò)激素及中藥治療后，各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著的提升，其效果以激素最為顯著，中藥稍弱。其中骨骼肌纖維的直徑、橫截面積和周長(zhǎng)的增高趨勢(shì)一致，均是按激素、中藥、正常、去卵巢這樣一個(gè)順序遞增，且激素、中藥與正常組間均存在差異；而單位橫截面積上的骨骼肌纖維數(shù)量上雖然也存在同樣趨勢(shì)，但激素組與中藥組間未見明顯差異，這可能是因?yàn)槲覀冎挥^測(cè)了骨骼肌纖維的各項(xiàng)參數(shù)，而肌纖維間組織在圖像分析中具有一定的干擾作用有關(guān)。

在絕經(jīng)后髖部骨質(zhì)疏松性骨折的風(fēng)險(xiǎn)研究中，有人提出：進(jìn)行絕經(jīng)后婦女髖部骨折風(fēng)險(xiǎn)的綜合預(yù)測(cè)時(shí)，必須同時(shí)考慮骨內(nèi)因素與骨外因素，骨內(nèi)因素主要指骨的量和質(zhì)，而骨外因素主要是肌肉的狀況。肌肉無(wú)論是在參與神經(jīng)肌肉功能發(fā)揮身體平衡與姿勢(shì)協(xié)調(diào)，還是參與摔倒力學(xué)中的能量吸收與保護(hù)性反應(yīng)的過(guò)程中，都占有不可替代的地位[8]。所以保持肌肉質(zhì)量和功能的正常對(duì)骨質(zhì)疏松患者具有重要意義?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿、補(bǔ)骨脂等補(bǔ)腎中藥含有黃酮類物質(zhì)，具有植物雌激素的作用特點(diǎn)，其中異黃酮具有控制雌激素受體的作用，既可表現(xiàn)較弱的雌激素作用，也可呈現(xiàn)雌激素拮抗劑的特點(diǎn)，并有種屬的特異性[9]。異黃酮作為較弱的雌激素激動(dòng)劑或拮抗劑，可以抑制破骨細(xì)胞的活性，增強(qiáng)成骨細(xì)胞的活性，維持成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞之間的動(dòng)態(tài)平衡，有效地預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松，又可避免或減少對(duì)機(jī)體帶來(lái)其他的副作用。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，中藥能夠在改善肌肉形態(tài)學(xué)方面，有一定作用，從而證明中藥能夠改善肌素質(zhì)，但較雌激素弱。所以我們認(rèn)為，中藥能夠在治療骨質(zhì)疏松癥的同時(shí)，增強(qiáng)肌系統(tǒng)的素質(zhì)，從而預(yù)防骨折發(fā)生，并減少運(yùn)動(dòng)損傷。但仍需深入研究，尋找更為安全有效的，在能夠治療骨質(zhì)疏松癥的同時(shí)，又對(duì)肌系統(tǒng)具有較強(qiáng)作用的組方。

【參考文獻(xiàn)】

〔1〕鄒移海,黃韌,連至誠(chéng),等.中醫(yī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)〔M〕.廣州:暨南大學(xué)出版社,1999.128

〔2〕LanyonLE.Usingfunctionalloadingtoinfluencebonemassandarchitecture:objectives,mechanisms,andrelationshipwithestrogenofthemechaicallyadaptiveprocessinbone〔J〕.Bone,1996,18:S37-S43

〔3〕FrostRM.Perspectivesonourage-ralatedbonemass:insightsfromanewparadigm〔J〕.JBoneMinerRes,1997,12:1539-1546

〔4〕楊欣,劉忠厚.骨強(qiáng)度在骨質(zhì)疏松診斷中的作用〔J〕.中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志,2003,9(3):279-282

〔5〕張林.運(yùn)動(dòng)對(duì)骨力學(xué)性能的影響——骨生物力學(xué)研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志,2002,21(1):85-88

〔6〕童普徳,石印玉,吳小江,等.補(bǔ)腎益精方對(duì)卵巢切除大鼠股四頭肌球蛋白重鏈基因mRNA表達(dá)的影響〔J〕.中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志,2001,9(4):1-4

〔7〕AnnaMika,ViswanathB.Unnithan,differencesinthoracickyphosisandinbackmusclestrengthinwomenwithbonelossduetoosteoporosis〔J〕.Spine,2005,30(2):241-246

〔8〕張戈,石印玉,秦嶺,等.絕經(jīng)后髖部骨質(zhì)疏松性骨折風(fēng)險(xiǎn)的研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志,2003,11(1):49-51

〔9〕SetchellK.Phytoestrogens:Thebiochemistry,physiology,andimplicationsforhumanhealthofsoyisisoflavones〔J〕.AmJClinNutr,1998,68(Suppl):1333s-1346s