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方法學范文第1篇

畢業于北京市翠微中學，參加2004年海淀區中考，以502分的成績考入首都師范大學附屬中學。

要學好物理，一定要聽好課。這是老生常談，也是我經過一段時間的摸索后得出的結論。

原來，我也曾嚴格按照預習――聽課――作業――復習的模式學習，可是收效甚微，并且出現了很多讓我感到煩惱的問題，比如在預習上花了很多時間，自以為弄懂了的問題其實并沒有理解；上課時總想著預習時碰到的問題，自己的思路與老師的思路總是打架，聽課效果不好；回家后由于要預習新課，做習題和復習的時間明顯減少，復習效果不佳……總結起來只有一句話：什么都做了，卻什么都沒做好。于是我決定改變學習方法。

我認為預習還是很有必要的，但只要大概看一下，畫畫概念即可，10分鐘的時間足夠。要在課后作業上下工夫，除了老師布置的作業，應爭取再多做一些題。我把這種學習方法叫做“前輕后重學習法”。即前面的預習少花點時間，要輕；后面的作業、復習要多花點時間，要重。

其實，聽課也應“前輕后重”。老師在上課時往往先回顧上節課的內容，再講解新知識。我的經驗是：在“溫故”部分不必太集中注意力，將主要精力放在接下來的重頭戲――“知新”上。據我所知，大多數同學恰恰相反，剛上課時注意力十分集中，聽著聽著就松弛下來了。人的注意力是有限度的，很少有人能夠做到在一堂課上自始至終保持高度興奮，反正我是做不到。

“前輕后重”的學習模式可是我的“九陽真經”哦！下面再傳授幾招具體的方法。

很多同學都覺得物理難學，因為與其他學科相比，物理的概念太多了。無概念則無物理，因此理解并掌握物理概念是學好物理的關鍵。在學習物理概念的過程中，我的絕招是――將物理概念層次化。

例如“勻變速直線運動”，可從以下幾個層次進行理解：

第一層：物體作直線運動（體現“直”字）；

第二層：物體的速度是變化的（體現“變”字）；

第三層：物體的速度是均勻變化的（體現“勻”字）。

綜合以上三個層次，很容易得出定義：物體沿直線運動，如果在任何相等的時間間隔內速度的變化均相等，這樣的運動叫做勻變速直線運動。

不管概念分幾個層次，也不管各層次之間是平行關系還是層層遞進關系，只要將每一層的含義弄清即可。

另外，概念的內容有輕有重，分層也應該有主次。應抓住本質的內容，區別非本質、容易混淆的部分。

例如“力是改變物體運動狀態的原因”，可分以下幾個層次：

第一層：力能改變物體速度的大小（如汽車靜止運動運動中止的過程中，速度由小變大再由大變小）；

第二層：力能改變物體的運動方向（如汽車左轉彎、右轉彎）；

第三層：力不是產生運動的原因，也不是維持運動的原因。

顯然第一層和第二層是這個概念的本質內容，而第三層則是容易混淆的部分。

最后再傳一招：“捧聽”與“追問”法。

所謂“捧聽”，就是上課時多回答問題，多提問。有時候，老師就像演員，然而，沒有一個演員希望觀眾對自己的作品毫無反應。上課時多提問，多回答，就相當于給老師捧場，老師肯定高興，對你的印象也加深了，何樂而不為呢？

所謂“追問”，就是有問題要追著老師問，別指望老師來找你。我就經常對老師進行瘋狂的“圍追堵截”，在辦公室圍著老師問，在走廊上追著老師問，在校門口堵著老師問，在路上攔住老師問……總之，一定不能讓問題累積成災！

最后，祝即將參加中考的同學考試順利，我在重點高中先替你占座了！

方法學范文第2篇

【關鍵詞】視覺傳達 方法學

設計是把設想、構思通過藝術化的手段表現出來，它是為實現某個目標而進行設計，在設計的過程中一直是目標導向的推理過程。視覺傳達也同樣是為成功傳遞某類信息而進行設計的，雖然對于海報、招貼、標志、包裝而言可能更加注重形式美感，特別是商業類的相關設計，但是它們同樣也需要成功地幫助人們傳遞一定的思想。那么視覺傳達所傳遞的信息，就是我們研究的第一步。

1 分解需要傳遞的信息

我們在進行任何視覺傳達設計前，都會獲得一定的信息，例如為“節約用水”設計公益海報，這條信息看起來很簡單。但是我們需要對其進行分解：（1）海報設計的目的是讓浪費水的現象減少。（2）人們看到海報能認可并欣然接受其傳遞的觀點。（3）此海報設計應該符合一類人的文化心理。（4）這一海報風格須和恰當的空間風格相統一。根據第一條命題得出結論：海報最好體現浪費水源所產生的惡劣后果，用以驚醒人們；根據第二條命題得出結論：海報內容最好貼近實事，避免人們認為海報過度夸張，產生不信任的心理；根據第三條命題得出結論：海報的設計風格最好貼近一類人群的文化心理；根據第四條命題得出結論：海報最終要擺放在特定的場合，最好能和這些場所的整體風格相一致。這個例子既體現了對信息的分解，也是設計師邏輯思維進行的過程，這需要在掌握大量感性材料的基礎上進行，通過推理認識事物的本質，除了以上這點，我們還需要對好的設計進行歸納整理。

2 歸納成功案例的優點

成功案例必然有它的可取之處，如果我們能善于總結和吸取成功設計的優點，就能踩在巨人的肩膀上前行。例如，孟謝爾在瀏覽了大量成功的色彩設計后，提出了互為補色的一對色彩關系，如何搭配才會比較漂亮的公式，即（A的明度×純度）：（B的明度×純度）=B的面積：A的面積，也就是明度和純度越高，面積就越小；明度和純度越低，面積就越大。

一些搜索引擎的記錄資料也可以給我們提供有用的信息，例如哪些海報、標志、包裝用戶點擊最多，評論最好？它們有沒有共同的優點？哪些點擊又最少，評論最差？

3 設計創意

創意不會憑空而來，它必然是在鎖定了目標以后，經過大量思索而來的。創意的產生需要通過觀看、體驗大量的設計作品，以一定的信息內容為基礎。創意出現的瞬間，設計師需要把它記錄下來，如果聽之任之、無動于衷，那好的創意必將離你遠去。因此，設計師最好隨身攜帶筆記本，以便能夠隨時捕捉靈感。也正像剛才所談，靈感的出現必然是經歷了由量變到質變的一個飛躍，量變發展到一定程度必然引起質變，只是人們在量變的過程中，大多被繁瑣的思考嚇退了，沒有等到質變那一刻。所以我們會聽說很多偉大的人物在冥思苦想的時候，會做出一些讓人啼笑皆非的事情。而這也恰恰是過量思考的體現，一個偉大的人物尚且如此過量思考，廢寢忘食。我們這些普通人要想產生創意就需要前期進行更長時間的思索，那么靈感最終會在你的腦海中出現。

4 缺點列舉法

缺點的提出，就像“良藥苦口利于病，忠言逆耳利于行”，雖然痛苦，但卻又提高。設計師對于自己親手設計的作品，往往由于投入了大量的時間和精力，產生了深厚的感情。如果此時要求繼續挑毛病的話，設計師往往很難理解和接受。但是必須挑出毛病，作品才能進一步完善，作品才會呈現得更加完美。缺點列舉法是改進和提升設計的有效方法。

5 特性列舉法

問題越復雜，就越需要對其進行分解，縮小問題才能產生創造性地構思。在設計過程中，有時我們面對的設計對象比較復雜，如果不對其進行分解，很難找出改進的落腳點。例如，一個包裝設計，需要解決材料、色彩、字體、圖形、造型等多方面的問題。如果你沒有在最初設計時就劃分不同的設計方向，那么你在之后的設計中往往會陷入思維混亂的局面。化整為零、各個擊破才是解決復雜問題的有效途徑。

6 包裝設計中的行為模擬

包裝設計在使用過程中會涉及到消費者的操作，當一些新型的包裝投入市場前，應該先進行相應的消費者行為模擬測試。在模擬測試中，設計師要注意幾個問題：（1）設計師預期的消費者行為是否出現？（2）在實際操作中，碰到什么問題？（3）預期的包裝創新設計是否發揮作用？如果測試結果和最初的預期不一致，就應該進行修正。

方法學范文第3篇

[關鍵詞]腳氣散；含量測定；硼酸

腳氣散由水楊酸、苯甲酸、硼酸等原料制成，具有抗真菌功效，用于腳癬所致的趾間糜爛、奇癢等癥，臨床使用多年，反映效果良好，幾無毒副作用。長久以來，由于屬于醫院制劑，應用范圍有限，質量標準中沒有建立有效成分的含量測定方法，根據目前我國對醫院制劑的新要求，筆者對處方中的水楊酸等有效成分的含量測定進行了方法學研究，現簡要介紹如下。

1儀器、試藥與樣品

BS210S電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）；硼酸含量為：99.5%（自貢鴻鶴制藥有限公司、批號：100311）、苯甲酸含量為：99.1%（鎮江前進化工有限公司、批號：100210）、水楊酸含量為：99.6%（鎮江前進化工有限公司、批號：100405）均為合格藥用原料；其余試劑均為分析純。由達州市中心醫院提供腳氣散3批，批號分別為：091113、091218、100220；達州市中西醫結合醫院提供腳氣散3批，批號分別為：100618、100628、100716；規格：均為每袋裝28g；包裝：藥品包裝用復合膜，4袋/盒。

2方法擬定

2.1原理：苯甲酸、水楊酸與硼酸是腳氣散的有效成分，雖有文獻【1】【2】【3】記載采用中和法測定單一成分的含量，但三種成分混合狀態下的含量測定還未查閱到相關的文獻報道，由于水楊酸、苯甲酸溶解性能非常近似，不能進行有效分離，故采用氫氧化鈉滴定液滴定測定二者總量，硼酸能與前二者進行有效分離，可單獨測定含量，方法簡便，結果快速、準確。具體原理如下。

水楊酸、苯甲酸乙醚層加水，加酚酞指示液，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，生成苯甲酸鈉及水楊酸鈉；微過量的氫氧化鈉溶液顯淡紅色為終點。

反應式C7H6O3+NaOHC7H5O3Na+H2O

C7H6O2+NaOHC7H5O2Na+H2O

硼酸（H3BO3）是一種極弱的酸（Ka1=7.3×10-10），因CaKa

反應式H3BO3+2C3H8O3[C3H6O3BC3H6O3]-H++3H2O

H++OH-H2O

2.2苯甲酸和水楊酸總量取本品5包研勻，精密稱取約0.3g，置分液漏斗中，加乙醚20ml、新沸過的冷水20ml，振搖使溶。靜置，分取乙醚層，加新沸過的冷水20ml，加酚酞指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至水層顯淡紅色。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于12.81mg的C7H6O2及C7H6O3總量。

2.3硼酸含量取上述項下的水層加中性甘油20ml，加新沸過的冷水20ml，加酚酞指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯淡紅色。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于6.183mg的H3BO3。

3驗證試驗

3.1樣品前處理研究：

3.1.1萃取溶劑的考察

有文獻【1】【2】記載，水楊酸及苯甲酸在乙醚中易溶，硼酸在水中溶解。故本實驗采用乙醚振搖萃取，可使水楊酸及苯甲酸與硼酸得到良好的分離。因水楊酸、苯甲酸溶解性能相近似，不能得到分離，故測定總量。

3.1.2萃取時間的考察

實驗結果見下表

萃取時間（分鐘 1 2 8

硼酸含量 98.5% 98.7% 98.9%

水楊酸及苯甲酸總量 98.6% 98.7% 98.5%

以上實驗結果表明，萃取時間對結果的影響不大，故以充分溶解為度。

3.2、方法學驗證

3.2.1樣品測定

3.2.1.1硼酸取樣品5包研勻，精密稱取約0.3g，置分液漏斗中，加乙醚20ml、新沸過的冷水20ml，振搖使溶解，分取水層，加中性甘油20ml、新沸過的冷水20ml，加酚酞指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯淡紅色。按每1ml氫氧化鈉液（0.1mol/L）相當于6.183mg的硼酸（H3BO3）計算，其結果（見表1）。

表1樣品測定結果

序號 樣品批號 樣品取用量（mg） 樣品硼酸標示含量（mg） 測得硼酸實際含量（mg） 標示百分含量 RSD

001 100618 300.8 129.0 126.5 98.0%

002 100618 300.2 128.8 127.1 98.7% 0.5%

003 100618 301.1 129.2 127.7 98.9%

004 100628 303.5 130.2 128.5 98.7%

005 100628 298.5 128.1 125.5 98.0% 0.4%

006 100628 299.9 128.7 126.1 98.0%

007 100716 300.2 128.8 127.1 98.7%

008

009 100716

100716 301.0

302.2 129.1

129.6 127.8

128.6 99.0%

99.2% 0.3%

3.2.1.2加樣回收

精密稱取在裝有五氧化二磷為干燥劑的干燥器中干燥24h的硼酸，加入樣品中同前法平行測定，按下列公式計算回收率，其結果（見表2）。

表2加樣回收

序號 加入量

（mg） 測出量

（mg） 回收率

（%） 平均回收率（%） RSD

001 108.9 107.8 99.0% 99.2% 0.3%

002 106.5 105.3 98.9%

003 151.2 150.7 99.7%

004 150.3 149.0 99.1%

005 201.1 200.3 99.6%

006 200.5 198.5 99.0%

3.2.1.3空白實驗精密稱取在裝有五氧化二磷為干燥劑的干燥器中干燥24h的水楊酸、苯甲酸，按處方比例混合均勻后，同前法平行測定，其結果（見表3）。

表3空白實驗

序號 加入量

（mg） 測出量

（mg） 測出量

（%） 平均值

（%）

001 102.0 1.1 1.1% 0.9%

002 151.5 1.4 0.9%

003 201.2 1.6 0.8%

3.2.2樣品測定

3.2.2.1苯甲酸和水楊酸總量分取2.1項下乙醚層，加新沸過的冷水20ml，加酚酞指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至水層顯淡紅色。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于12.81mg的C7H6O2及C7H6O3總量。其結果（見表4）。

表4樣品測定結果

序號 樣品批號 樣品取用量（mg） 樣品總量標示含量（mg） 測得總量實際含量（mg） 標示百分含量 RSD

001 100618 300.8 171.8 169.9 98.9% 0.4%

002 100618 300.2 171.4 170.2 99.3%

003 100618 301.1 171.9 169.3 98.5%

004 100628 303.5 173.3 172.5 99.5% 0.4%

005 100628 298.5 170.4 169.3 99.3%

006 100628 299.9 171.2 169.2 98.8%

007 100716 300.2 171.4 169.0 98.6% 0.4%

008 100716 301.0 171.9 169.0 98.3%

009 100716 302.2 172.6 168.8 97.8%

3.2.2.2加樣回收精密稱取在裝有五氧化二磷為干燥劑的干燥器中干燥24h的水楊酸、苯甲酸，按處方比例混合均勻后，加入樣品中同前法平行測定，其結果（見表5）。

表5加樣回收

序號 加入量

（mg） 測出量

（mg） 回收率

（%） 平均回收率（%） RSD

001 106.1 104.6 98.6% 99.0% 0.3%

002 105.5 104.5 99.0%

003 150.2 148.9 99.1%

004 150.9 148.9 98.7%

005 201.2 200.0 99.4%

006 200.9 199.5 99.3%

3.2.2.3空白實驗精密稱取在裝有五氧化二磷為干燥劑的干燥器中干燥24h的硼酸，同前法平行測定，其結果（見表6）

表6空白實驗

序號 加入量

（mg） 測出量

（mg） 回收率

（%） 平均值

（%）

001 108.9 1.0 1.0% 0.9%

002 125.9 1.1 0.9%

003 131.2 1.1 0.8%

3.3樣品測定值與標示量比較值

苯甲酸及水楊酸總量和硼酸測定結果按標示量%計算，結果見下表（表7）

批號 091113 091218 100220 100614 100628 100716

硼酸含量 94.9% 92.5% 98.9% 98.4% 98.3% 98.9%

水楊酸及苯甲酸總量 98.2% 102.2% 92.3% 98.9% 99.1% 98.2%

3.4含量限度的確定

根據上述測定結果，含量測定限度訂為標示量的90.0%～110.0%，收入標準正文。

3.5樣品取用量經過實驗得到以下結果：

樣品量（克） 消耗NaOH滴定液（0.1mol/L）體積（ml）

苯甲酸和水楊酸總量 硼酸

0.2506 11.20 17.40

0.3020 13.50 21.00

0.3511 15.70 24.40

根據上述測定結果，確定樣品取用量約為0.3克較為合理。

4討論

苯甲酸及水楊酸總量滴定度的說明：分別按處方量比例計算得到，（13.81×214÷571）+（12.21×357÷571）=12.81。

5其他

處方組成：水楊酸適量苯甲酸適量硼酸適量，制成1000g

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].2005年版.北京：化學工業出版社，2005，2：64.321.813.

方法學范文第4篇

【關鍵詞】 血氨；方法學；光密度

正常人體內游離血氨（blood ammonia，BA）含量極低（正常值20～60 μmol/L）［1］，其主要來源于體內蛋白質在代謝過程中產生的氨基酸，以及經脫氨作用分解而來的內源性氨，正常情況這種氨可形成酰胺及合成其他含氮化合物而不斷地被轉化；另一來源是蛋白質類食物在腸道內經細菌分解而成的外源性氨，正常情況下此氨經門靜脈進入肝臟被合成為脲，經腎臟排出體外。然而在發生代謝障礙性疾病，如肝性昏迷、肝性腦病、重型肝炎、尿毒癥等由于氨不能正常代謝排出體外而引起BA升高。肝功能極度衰竭或血液不能正常地流經肝臟轉換等嚴重肝臟疾病，氨不能從循環中及時清除均可使血氨增高［1］。高BA有神經毒性，BA的測定對于肝硬化門脈高壓、肝昏迷、Reve’s綜合征及兒科的一些先天性代謝紊亂等病的診斷、觀察和預后判斷有著重要意義［2］。BA的測定方法有微量擴散法、比色法、離子交換法、氨電極法、酶法等。筆者在結合本實驗室現有條件，參考國內外有關文獻建立快速、準確的檢測BA方法，為臨床該類疾病的診斷、治療提供參考。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

電子天平 COBS120型（朝鮮COBS公司），紫外分光光度儀HP8453（美國惠普），離心沉淀器800型（上海手術儀器廠），YKHI型液體快速混勻器（江西醫療器械廠），DHW420三用電熱恒溫水箱（北京東霞科學儀器廠）。

1.2 試藥

鎢酸鈉（天津市大茂化學試劑廠，批號030906），硫酸銨（重慶北碚化學試劑廠，批號050329），亞硝基鐵氰化鈉（上海三愛思試劑公司，批號20020204），苯酚（重慶北碚化學試劑廠，批號：20000924），氫氧化鈉（重慶川江化學試劑廠，批號20000312），次氯酸鈉（重慶川東化工集團化學試劑廠，批號20040904），硫酸銨（重慶北碚化學試劑廠，批號050329），硫酸（重慶川江化學試劑廠，批號20000105），所用試藥均為分析純，水為新制無氨蒸餾水。

2 方法與結果

2.1 儲備溶液的配制［2］

無氨水的制備：參照文獻［3］取重蒸水1 000 mL，加稀硫酸1 mL與高錳酸鉀試液1 mL，蒸餾即得備用。

酚顯色劑：精取亞硝基鐵氰化鈉25.00 mg，與適量苯酚混合后加無氨水至100 mL，過濾即得。

堿性次氯酸鈉溶液：精取250 mg次氯酸鈉，氫氧化鈉2 500 mg，溶于100 mL無氨水中即得。

0.5 mol/L硫酸溶液、5 mmol/L硫酸銨溶液參照文獻方法［3］配制。

2.2 標準溶液的配制

分別精取“2.1”項的硫酸銨儲備液20、200、500、1 000、1 500、2 000、4 000 μL置于50 mL容量瓶，立即加無氨水至刻度即得10、20、50、100、150、200、400 μmol/L的硫酸銨系列標準溶液。

2.3 標準曲線的制備

取“2.2”項的硫酸銨系列標準溶液各1 mL，分別加入10 %的鎢酸鈉溶液、0.5 mol/L硫酸溶液各0.5 mL，渦旋震蕩1 min，4 000 r/min離心5 min，分取上清液1 mL，依次加入酚顯色劑和堿性次氯酸鈉溶液各1 mL，渦旋1 min后置37 ℃水浴20 min，以空白管校正后于630 nm處測定OD值；將所測得的吸收度OD值對濃度進行線性回歸處理得回歸方程：OD=0.0017C+0.23，相關系數r=0.9964，根據(NH4)2SO4與游離氨的定量關系，即得游離氨濃度在5～200μmol/L的定量線性范圍（見圖1）。

2.4 臨床樣本的測定

參考國內外有關文獻，經優化后測定BA的方法為：離體血液立即加入過量定量的10%鎢酸鈉及0.5 mol/L硫酸溶液，使蛋白沉淀的同時，血液中的氨與硫酸形成硫酸銨而存留于血濾液中，再以酚次氯酸鈉顯色劑顯色后于波長630 nm處測定OD值，即可定量測定BA。

2.5 方法的回收試驗

按“2.2”項的方法分別配制高、中、低（400、200、40 μmol/L）的硫酸銨標準溶液適量，各取1mL分別加入1 mL無氨正常血漿，混勻后精密量取1 mL按2.4項下的方法分別精密加入0.5 mL 10 %鎢酸鈉和0.5 mol/L硫酸溶液各0.5 mL，以下按準曲線項下相應的方法處理并分別測定其OD值，將測得的OD值代入標準曲線計算測得量與回收率，結果見表1。表1 血氨回收試驗（略）

2.6 精密度試驗

配制低、中、高（25、50、75 μmol/L）3個濃度含無氨正常血漿的硫酸銨溶液各3份，日內4 ℃冷藏保存，每間隔1 h按2.3標準曲線項下的方法測定1次，連續測定5次。另取相同樣品18 ℃冷凍保存，每日測定1次，連續測定5日。所得OD值代入標準曲線方程計算得游離氨濃度，結果見表2。表2 血氨精密度試驗（略）

2.7 穩定性試驗

取硫酸銨溶液適量配制成75 μmol/L含無氨正常血漿的硫酸銨溶液，分別置于4 ℃冰水浴和18 ℃條件下儲藏保存，每次平衡5 min后各取1 mL樣品，按“2.6”精密度試驗項下的測定方法，4 ℃下保存的標本在1 d內每間隔2 h測定1次，每次平行測定5份，直至14 h共測定8次；18 ℃條件下保存的標本每天定時測定1次，每次平行測定5份，連續測定7 d，將測得的OD值通過標準曲線方程計算游離氨的實際含量，結果見表3。由表可知新鮮血中游離氨極不穩定，常溫和4 ℃冷藏保存均不穩定，宜在2 h內測定，在18 ℃下保存也宜在24 h內測定。表3 血氨穩定性試驗（略）

2.6 臨床應用

選擇我院近2年來的住院患者，除外肝、膽、腎疾病患者。腦梗塞患者28例，其中男16例，女12例，平均年齡（55.8±10.5）歲；腦溢血患者25例，其中男15例，女10例，平均年齡（60.4±15.4）歲；腦炎患者10例，其中男6例，女4例，平均年齡（39.8±13.5）歲。全部病例均經臨床及CT和（或）MRI檢查。對照組25例，經檢查全部健康正常，其中男13例，女12例，平均年齡（57.2±14.3）歲。全部患者均在昏迷期及恢復期各采取肘靜脈血1～2 mL，肝素抗凝，立即用上述方法測定血氨，對照組也同時采血測定血氨。

結果對照組血氨含量為（56.53±29.15）μmol/L，腦梗塞組昏迷期血氨含量為（179.00±108.59）μmol/L，恢復期為（66.89±26.67）μmol/L，昏迷期與對照組經χ2檢驗差異有統計學意義（χ2=12.68，P0.05）。腦溢血組昏迷期血氨含量為（146.97±72.41）μmol/L，恢復期為（60.46±24.39）μmol/L，昏迷期與和對照組比較差異有統計學意義（χ2=11.78，P0.05）。腦炎組昏迷期血氨含量為（197.17±62.10） μmol/L，恢復期為（59.83±39.59）μmol/L，昏迷期與對照組顯著增高（χ2=9.72，P0.05）。

3 討論

由表3結果表明：標本放置時間越長，其血氨濃度越高，主要原因可能是血液細胞自身代謝或部分微生物代謝后產生氨致使其血氨濃度升高。為保證測定結果的準確應注明標本的采集時間并立即送檢，送檢標本迅速測定（30 min內），同時進行平行質控監測。病人標本采集后如不能立即測試，應在2～8 ℃冷藏最多3 h測定，18 ℃冷凍保存最多24 h測定。

正常情況下，體內大部分氨經過尿素循環形成尿素自尿中排出，部分為機體再利用，不會產生蓄積，而在尿素循環障礙疾病時則將出現血氨蓄積，在新生兒當血氨大于150 μmol/L、嬰幼兒大于80 μmol/L、成人大于70 μmol/L可確定為高氨血癥［45］。血氨可干擾腦的能量代謝，腦組織在氨的生成中需消耗某些輔酶、高能磷酸及大量α酮戊二酸，引起高能磷酸化合物濃度的降低，過量氨還可能抑制丙酮酸脫氫酶活力而影響乙酰CoA的生成和乙酰膽堿的合成，干擾三羧酸循環，氨還可抑制Na+K+ATP酶，直接影響鉀、鈉在神經細胞膜上的正常分布，干擾神經傳導活動，當腦組織炎癥、缺血、缺氧時就影響了氨的代謝使氨增高。腦缺血后可導致生化代謝方面的變化，影響氨的平衡，腦組織內氨水平增高。有實驗表明，大鼠在腦循環中斷5 min后，其缺血的皮層氨含量從對照值的0.28 mmol/L升高到1.12 mmol/L。在腦組織內，氨的解毒主要靠α酮戊二酸的氨化作用以及氨與谷氨酸結合生成谷氨酰胺，但后者的反應需要消耗ATP，在缺血情況下α酮戊二酸的氨化起主要作用。同時昏迷患者常常禁食，致使液體攝入減少或用脫水劑過量，從而致使血氨顯著增高。此外，由于感染、高熱等增加機體代謝，也使內源性血氨增高。國外學者KanamoriK等研究了小鼠體內的氨、谷氨酰胺以及谷氨酰胺合成酶與腦病的關系，表明腦病與氨相關［6］。國內李英杰等［7］測定22例腦梗塞患者的血氨和CSF氨含量，結果表明急性期血氨和CSF氨顯著高于對照組（P

參考文獻

［1］李影林. 臨床醫學檢驗手冊［M］. 第1版. 吉林: 吉林科學技術出版社， 1990: 503.

［2］孔祥云， 徐勉忠. 實用臨床醫學檢驗［M］. 第1版. 武漢: 湖北科學技術出版社， 1984: 1121.

［3］中華人民共和國藥典委員會. 中華人民共和國藥典(二部)［S］. 2005年版. 2005， 附錄: 134.

［4］Nyhan WL， Ozand PT. Atlas of metabolic diseases［M］. London: Chapman Hill Medical， 1998: 167187.

［5］顧學范， 葉 軍. 新生兒疾病篩查［M］. 第1版. 上海: 上海科學技術文獻出版社， 2003: 227233.

方法學范文第5篇

【關鍵詞】 金標法；乙肝表面抗原

乙肝表面抗原（HBsAg）是乙型肝炎病毒外殼蛋白中的主要成分陽性是感染乙肝病毒的標志，是檢查乙肝血清標志物中較重要的一項［1］。近年來發展的金標法檢測HBsAg，與傳統的酶免疫法（EIA）相比，具有簡便、快速、準確，不需要儀器設備等優點，能滿足臨床急診快速出結果的需要，且較適合使用于流行病學調查，應用前景非常寬廣。

1 材料與方法

1.1 材料 （1）金標試紙條：上海洪泰生物技術發展有限公司產品。（2）HBsAg靈敏度標準參比品：中國藥品生物制品檢定所產品。（3）HBsAg酶免疫診斷試劑盒，HBsAg、HBcAg、HBeAg陽性對照血清：中外合資上海實業科華生物技術有限公司產品。（4）血清標本：1200份體檢及臨床血清標本，其中乙型肝炎患者血清172份，健康人血清1028份。

1.2 方法 （1）5ng/ml標準參比品 用生理鹽水分別稀釋成4ng/ml，3ng/ml，2ng/ml，1ng/ml幾種濃度，各取0.1～0.2ml置于潔凈試管中，用金標法試紙條進行檢測，嚴格按照說明書所述，將測試條有金標抗體端插入血清內，放置一定時間后觀察結果。（2）HBsAg、HBcAg、HBeAg陽性對照血清各取3份，每份為0.1～0.2ml加入已備好潔凈試管中，用金標法對各份血清進行檢測。（3）分別用金標法、EIA法對1200份體檢及臨床血清標本進行檢測。（4）將金標試紙條各10條分置于37℃、室溫（25℃）保存5天，做熱穩定試驗。

2 結果

（1）用金標法對5種濃度的HBsAg陽性標準參比品進行檢測。結果確定時間：強陽性參比品（4～5ng/ml）在2min內即可在檢測線見到紅色膠體金顆粒聚集；陽性參比品（3mg/ml）在5min內即可出現兩條紫紅色線條，弱陽性標本（1～2ng/ml）約需20min確定結果。說明了金標法敏感性較強，靈敏度可達1ng/ml，可以滿足臨床要求。（2）將金標試紙條分別插入HBsAg、HBcAg、HBeAg陽性對照血清各3份中，結果只有HBsAg陽性對照血清管中試紙條出現兩條紅色線，說明該試紙條只與HBsAg有特異性反應，特異性強，不易出現假陽性。（3）分別用金標法、EIA法對1200份體檢及臨床血清標本進行檢測，所得結果顯示：金標法與EIA法所做結果有162例陽性結果一致，有1026例陰性結果一致，有12份血清兩法檢測結果不符，比較兩法檢測HBsAg的一致性，符合率為99.0%。12份兩法結果不符的血清中，有5例（乙肝組3份，健康組2份）金標法呈弱陽性，而EIA陰性，但這5份血清EIA吸光度值均接近臨界值。另7例（均為乙肝組血清）金標法陰性，EIA為HBsAg弱陽性。通過計算，可得出金標法臨床靈敏度為95.9%，臨床特異性為99.8%，臨床準確度為99.2%，陽性預測率為98.8%。（4）將金標法試紙于37℃、25℃各10條放置5天后，測定10份不同血清標本（乙肝組與健康組各5例），所得結果與放置4℃的試紙檢測結果無明顯差別。說明金標法試紙條性質較穩定，易保存。

3 討論

HBsAg的檢測可作為乙型肝炎病毒感染的一個重要指標，目前多采用EIA或EIA一步法，由于其試劑盒中酶標試劑不易保存，操作中需通過加樣、加試劑、孵育、洗板等一系列過程，延時長，且易引起標本間交叉污染或陽性標本對人體的污染，給實驗室檢測工作帶來一些不便，不能滿足臨床急診快速出結果的要求。

近年來，隨著現代免疫化學技術的發展，出現了膠體金免疫層析法［2］。該法是將羊抗HBs、羊抗鼠IgG分別固定在特制的纖維素試帶上并呈兩條線上下排列，羊抗鼠IgG線在試帶條上方為陰性對照，抗HBs在下方為測定。試帶條中含均勻分布的膠體金-抗HBs和無關的金標記鼠IgG。檢測時血清沿試帶上行，其中HBsAg在上行過程中與膠體金-抗HBs結合，待行至羊抗HBs線時，形成金標記抗HBs-HBsAg-抗HBs復合物而在試帶上顯紅色線，試帶上無關的金標鼠IgG隨血清繼續上行至羊抗鼠IgG處時形成紅色金標復合物為陰性對照。判斷結果時，出現兩條紅色線時為陽性，只在對照線出現紅色線時為陰性，如對照線未出現紅色，則表明該試紙條失效。該法集免疫反應與免疫層析的特點，靈敏度高，特異性強，且試紙條輕便易帶易保存、易操作，無需儀器設備，病人標本可隨來隨查，20min內即可發出結果，適合于大批健康體檢、流行病學調查及門診急診標本的應用。

當然，該法與EIA相比，只能作定性檢查，靈敏度稍差，易將少數弱陽性標本忽視，出現假陰性，具體原因及改善辦法，有待進一步探討。

【參考文獻】