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感人肺腑范文第1篇

1、我能想到最浪漫的事，就是和你一起慢慢變老，直到我們老的哪兒也去不了，你還依然把我當(dāng)成手心里的寶。

2、不管發(fā)生了什么事，我都會在你身邊陪伴著你，對你不離不棄。只要你有需要我的地方，我一定義不容辭的幫你。我不會離開你我永遠(yuǎn)都是你最好的朋友。

3、有個懂你的人，是最大的幸福。這個人，不一定十全十美，但他能讀懂你，能走進(jìn)你的心靈深處，能看懂你心里的一切。最懂你的人，總是會一直的在你身邊，默默守護(hù)你，不讓你受一點(diǎn)點(diǎn)的委屈。真正愛你的人不會說許多愛你的話，卻會做許多愛你的事。

4、你走了，帶著我全部的愛走了，只是一句分手。我忍著眼淚看著你的背影，好想最后在抱你一次，好想在對你說一次“我愛你”。

5、茫茫人海我們能夠遇見并成為了朋友，說明我們之間有緣分，而我的無心之過卻毀了它，對此我深感抱歉，希望你可以再給我一次做你朋友的機(jī)會？讓我們的緣分能夠一直持續(xù)下去。

6、朋友是琴，演奏一生的美妙，朋友是茶，品位一世的清香，朋友是筆，寫出一生一世的幸福和快樂，朋友是歌，唱出一輩子的溫馨，祝您天天快樂！

7、喜歡手被你握在掌心的那種感覺。想和你深愛到老，牽手一生。原諒我曾經(jīng)的任性和刁蠻。愛你！

8、如果愛你是上天交給我的任務(wù)，我愿意這個任務(wù)是永久，它不應(yīng)有期限。因為上天知道我會好好的珍惜你的。

9、你的問候是來致深山里的一股清泉，你的笑容讓我今生迷醉，遠(yuǎn)方的朋友讓我問候你一聲還好吧。

10、你的心就是我的海角和天涯，我不能去得更遠(yuǎn)。我們此生共赴天涯海角，不是游走半個地球，而是人間相伴。

11、快樂要有悲傷作陪，雨過應(yīng)該就有天晴。如果雨后還是雨，如果憂傷之后還是憂傷，請讓我們從容面對這離別之后的離別。微笑地去尋找一個不可能出現(xiàn)的你。

12、往事如夢似煙，多少甜蜜，多少懷念?？v然相隔遙遠(yuǎn)，你的情意永駐我心田。

13、一直以為幸福在遠(yuǎn)方，在可以追逐的未來。后來才發(fā)現(xiàn)，那些擁抱過的人，握過的手、唱過的歌、流過的淚、愛過的人、所謂的曾經(jīng)，就是幸福。在無數(shù)的夜里，說過的話、打過的電話，思念過的人、流過的眼淚……看見的或看不見的感動，我們都曾經(jīng)過，然后在時間的穿梭中，一切成為了永恒！

14、有了你我的生命多了希冀，我不會在今天哭泣，為了你我會努力，在受傷時忍住淚滴，大口的呼吸！

15、新衣會慢慢變舊，人會慢慢變老。時光流逝，斗轉(zhuǎn)星移，但我對你的愛將歷久彌新。我們的誓言也永不更改。

16、在人群之中尋覓著你，就彷佛在海邊掬起所有的沙粒，急于發(fā)現(xiàn)你的蹤跡，如果不從愿，但愿還有來生。

17、把你比作我的命實在太貶低你了，對于我而言你比什么都重要，我寧愿失去全世界也不愿失去你。

18、等待使我度過了漫長的一個世紀(jì)，雖然我不知道你和你的明天在哪里，但我始終堅信我愛你。只要心中有愛，我還可以為你度過另一個世紀(jì)，直到與你再次相遇，成為你的唯一。

19、當(dāng)歲月燃燒我的一切時，不能忘記的是你那一眼的風(fēng)情；當(dāng)我合上雙眼時，我渴望的仍是你那一眼的風(fēng)情！

20、每時每刻在看著你，我總覺得看不夠；天天呆在一起，我還覺得呆不夠；總想把你摟在懷，將你融化在我的愛里。

21、有一種情感在你我之間，有一種感謝，讓我無法表達(dá)；有一種歉意，讓我說不出口；但唯一一種信物，就是舍不得你的離開。

22、朋友是一輩子的事，不管歲月流逝，多久多遠(yuǎn)，我依然記得，那份曾經(jīng)共有的情誼，祝福你，永遠(yuǎn)的朋友！

23、一朵鮮花代表一份簡單純潔的愛情，一束鮮花代表一段狂熱沖動的愛情，一團(tuán)鮮花則代表一句一生一世的承諾！

24、每個夜晚來臨的時候，我心中都充滿期待。打開電腦，心情的愉悅或失落在QQ閃現(xiàn)的那一刻定格。只是看著你閃亮的頭像就有說不出的親切。當(dāng)你手指也許是隨意的擊打鍵盤時，我的不僅是文字，還有莫名的暖流涌入心田。

25、假如人生不曾相遇，我還是那個我，偶爾做做夢，然后，開始日復(fù)一日的奔波，淹沒在這喧囂的城市里。 我不會了解，這個世界還有這樣的一個你，只有你能讓人回味，也只有你會讓我心醉。 假如人生不曾相遇，我不會相信，有一種人可以百看不厭，有一種人一認(rèn)識就覺得溫馨。

26、傻是我的特長，癡是我的理想，當(dāng)傻和癡交織在一起的時候，便是我夢境里最美的天堂，別笑我，我就這么癡心，我會傻傻的愛你癡癡的戀你，一直到老。

27、如果有一天你覺得疲憊，只要一轉(zhuǎn)身，我的祝福就在你身邊，我的愛會一直守護(hù)你，我親愛的朋友。

28、不同的時間，不同的地點(diǎn)，不同的人群，相同的只有你和我；時間在變，空間在變，不變的只有對你無限的思念！

29、當(dāng)你不如意時，記得還有一個我陪你一起分擔(dān)，不管多麼不如意，相信你絕非不是一個人孤軍奮戰(zhàn)，因為我會一直陪著你，直到你找到自已的避風(fēng)港。

30、不敢說我會等你一輩子，因為我沒有幾個四年可以去耗費(fèi)。但相信我會愛你一輩子，因為你給我的沒有人能再給我。

31、分開的一分一秒使我明白，男人的心也是玻璃做的；想你的每時每刻讓我懂得，我的心也需要愛的撫慰。

32、一份不渝的友誼，執(zhí)著千萬個祝福，給我想念的朋友，溫馨地問候。

33、打開你的手機(jī)，收到我的祝福，忘掉所有煩惱，你會幸福每秒，對著鏡子笑笑，從此開心到老，想想明天美好，相信自己最好。

34、我再怎樣忙，也不克不及遺忘伴侶之間的蜜意！祝你夏天清冷，心似藍(lán)天，把戲漂亮，終身幸福！

35、每一段記憶，都有一個密碼。只要時間，地點(diǎn)，人物組合正確，無論塵封多久，那人那景都將在遺忘中重新拾起。()你也許會說“不是都過去了嗎？”其實過去的只是時間，你依然逃不出，想起了就微笑或悲傷的宿命，那種宿命本叫“無能為力”。

36、我愿做一棵樹，屹立在你必經(jīng)的路上。我愿做一片云，替你抵擋烈日。我愿做一把傘，經(jīng)受暴風(fēng)驟雨。這就是愛情！

37、想跟你說：朋友是會默默在身邊支持你的，如果遇到了不順心的事情就回頭看看，你會發(fā)現(xiàn)還有我從始至終都在陪伴著你。快樂起來吧！

38、朋友，既然為友人，那我們就要風(fēng)雨同舟，一同向前，共同進(jìn)步，為我們的夢想奮斗吧！堅信，我們會有雨過天晴的那一天。朋友，你的傷，即是我的痛，讓我與你分擔(dān)你的苦；我的樂，亦是你的笑，讓我們共同分享我們的快樂。作到同甘共苦。

39、這一輩子，我需要的不多，一碗飯一杯茶而已，但是我希望飯是你做的，茶是你泡的。

40、初遇你的心情是溫馨的，和你交友的時候是真心的，與你在一起的時候是開心的，認(rèn)識你這個朋友是無怨無悔的。

41、好聽的故事沒有結(jié)局，真摯的友誼不用言語，惦念的朋友才有短信，祝福的電波不會休息，美好的向往沒有距離，問候的短信表達(dá)心意！

42、你固然會失去一切，但你永遠(yuǎn)都不會失去我。我不愿離開你，也永遠(yuǎn)都不會離開你。倘若有一天我們分開了，那么彩虹天堂的那端，我們再見……

43、魅力是什么？魅力不是漂亮，漂亮的女人不一定能吸引我，端莊幽雅的女人我才喜歡。所以你不用擔(dān)心自己不夠漂亮。

44、愛是一種感受，即使痛苦也會覺得幸福；愛是一種體會，即使心碎也會覺得甜蜜；愛是一種經(jīng)歷，即使破碎也會覺得美麗。

45、你的懷抱是我的避風(fēng)港，你的眼神是我的堅持的信念，你的好是別人無法比擬的！我想告訴你：我們的愛，是世界上最幸福的愛。

46、美麗的彩虹在雨后，真心的想念在別后，好運(yùn)好夢好心情在你收到短信后，親愛的朋友，真心希望這一刻，幸福美妙就在你身旁。

47、天，因為有了陽光，所以很藍(lán)；地，因為有了春雨，所以很綠；海，因為有了風(fēng)兒，所以很寬；心，因為有了你，所以很美！

48、你孤獨(dú)時，風(fēng)兒就是我的歌聲，愿它能使你得到片刻的安慰；當(dāng)你驕傲?xí)r，雨點(diǎn)就是我的警鐘，愿它能使你獲得永恒的謙遜。

49、我以為小鳥飛不過滄海，是小鳥沒有飛過滄海的勇氣，十年后我才發(fā)現(xiàn)，不是小鳥飛不過去，而是滄海的那一頭，早已沒了等待…

50、朋友，你是我生命中的一首詩，朋友，你是我奮進(jìn)的原動力。沒有你的日子里，我不知道是怎樣熬過十個春夏秋冬，而有你的二十多天里；我的生活是如此的快樂。

51、我不知道如何才能表達(dá)我對你的那分情，我只知道沒有你我會憔悴到死，就象那朵凋謝的玫瑰一樣，失去靈魂！

52、手機(jī)都有轉(zhuǎn)移功能，你也發(fā)揮一下轉(zhuǎn)移嘛，把不快，不如意都轉(zhuǎn)移掉，實在不行你就轉(zhuǎn)移給我吧，我希望看到快樂的你，那就我最大的心愿。

53、朋友，本是知情、知己、友情人，一天不見非常想念，兩天不見非常掛念，幾天不見非常懷念，祝你新年財運(yùn)亨通，吉祥如意！

感人肺腑范文第2篇

德陽市東汽中學(xué)教師譚千秋的遺體在廢墟中找到時，是“雙臂張開趴在課桌上”的，身下死死護(hù)著4名學(xué)生，他和死神做了一個以一換四的“交易”?！按盒Q到死絲方盡，蠟炬成灰淚始干！”這位中學(xué)老師在地震開始的幾秒鐘內(nèi)意識到“大地在發(fā)怒”，他迅速指揮學(xué)生下樓到安全的地方，在房屋快倒塌的一瞬間，他一個平凡的“雄鷹展翅”護(hù)住了四名學(xué)生，他以自己的行動最生動地詮釋了“老師”的真義。

老師，我淚流滿面！老師，我深致敬意！在自然的威力面前，老師，您的軀體同樣柔弱，但您卻在極端的條件下構(gòu)筑了生命的空間。在廢墟的現(xiàn)場，您留給我們的最后姿態(tài)是生命對生命最有力的掩護(hù)。您與世界訣別的那一刻，卻是給我們所有人上的最后也是最震撼的一課。老師，謝謝您！

當(dāng)我看到這張照片的時候，我哽咽了，心里有一種無法用語言來形容的感動。讓我們一同來接受一次心靈的洗滌吧！

感人肺腑范文第3篇

“二十年后來相會”發(fā)言稿這么多天了，我一直在問自己：是什么能有這么大的凝聚力？能讓全班的同學(xué)從世界各地齊聚重慶。是組織者的號召力？化學(xué)班的凝聚力？重慶大學(xué)的召喚力？還是美麗山城的吸引力？不！是緣分，是你我間那份同學(xué)的情誼，是我們曾經(jīng)一起度過的青春歲月烙在你我心中的那深深的印跡，在召喚著你我，來履行我們青春的約定（音樂）！二十年沒見了！同學(xué)們。多少次，我在腦海里猜想過你的模樣，多少次，我在夢鄉(xiāng)里幻聽過你的聲音。但，直到今天，直到見到大家，那模糊的記憶才逐漸清晰，你的音容笑貌才撥開虛幻的面紗，真實地展現(xiàn)在我的眼前。鄉(xiāng)音未改風(fēng)度添，紅顏褪去鶴發(fā)染，瞇眼相識不相認(rèn)，定睛看去仍青年。憑心而論，人一生中真正難以忘懷的日子不多。

但是，我相信，今天—對于在座的每一位同學(xué)來說，都將是終身難忘的！同學(xué)們，還記得這首歌嗎？為了它，我們從海內(nèi)外趕來重逢，在今天這個難忘的日子里，除了相互傾訴離別之苦、重逢之喜外，留在我們心中更多的則是對青春年華的追憶，是對已逝歲月的感慨。毋庸質(zhì)疑，大學(xué)生活是人生的精華，值得慶幸的是，我們在座的每一位都相識在那精華的歲月里！還記得嗎？球場上他矯健的身影，教室里你專注的神情，班級舞會上她緬甸的眼神、優(yōu)美的舞姿，廁所中冬日晚傳出的沖涼的嚎叫，半夜里翻墻回寢室的他淅嗦的腳步聲，百米考試時我故意前挪的起跑線……還記得嗎？民主湖那并不太清的湖水，也不夠高的假山；女生宿舍那男生向往但又不能自由進(jìn)出的禁地；華巖水庫，我們一起暢飲的綠豆燒白酒；大足石刻，你我曾經(jīng)小歇的綠地斜坡……。哦，太多了，記憶的潮水快要淹過我的頭頂，我都快喘不過氣來了。

我們大家20歲相識，20年后的今天又重逢在一起。這樣的加法做不了幾次呀，我的同學(xué)們！讓我們在回憶過去的時候，更加珍惜今天，更加注重未來吧，我相信，這次聚會定會使這份沉顛顛友情延向你我的有生之年，甚至將它通過我們后代延向更遠(yuǎn)的未來。俗話說：失去的東西你才知道珍惜。為什么要等到失去以后呢？我呼吁：把握住今天吧，把握住我們已有的這份珍貴友誼吧，在我們的有生之年一起分享歡樂與憂愁，一起促成一些我們想做、但又單靠自己做不了的事情……

感人肺腑范文第4篇

2、新年祝福語：當(dāng)你看見這信息時，幸運(yùn)已降臨到你頭上，財神已進(jìn)了你家門，榮華富貴已離你不遠(yuǎn)。祝福你新年快樂!

3、新年祝福語：新年又至送去大衣一件，用它裹住溫情，懷揣浪漫的愛情，兜滿幸福的友情，扣緊身體健康，阻隔厄運(yùn)，每天都有好心情!

4、新年祝福語：新年誰最紅?速度趕超劉翔，挺拔有如姚明，英俊蓋過田亮，富?？购馕淦?，女友靚過晶晶.還有誰，就是看短信的你呀!

5、新年祝福語：我的祝?？邕^重重高山，掠過條條小溪，跳過大馬路，竄過小胡同，閃過賣冰糖葫蘆的老太太，鉆進(jìn)你耳朵里-新年快樂!

6、新年祝福語：一片綠葉，飽含著它對根的情誼;一句賀詞，濃縮了我對你的祝愿。又是一個美好的開始--新年歲首，祝成功和快樂永遠(yuǎn)伴隨著你。

7、新年祝福語：遠(yuǎn)方的你是否無恙?在遙遠(yuǎn)的思念里，改變的是我的容顏，不變的是永遠(yuǎn)愛你的心!真心愿你新年快樂!

8、新年祝福語：你在新年夜被通緝了，你的罪行是：1.對朋友太好，又夠義氣;2.青春的面孔，燦爛的笑容。本庭現(xiàn)判決罰你終身做我的朋友，不得上訴!

9、新年祝福語：金錢是一種有用的東西，但是只有在你覺得知足的時候，它才會帶給你快樂。所以你應(yīng)該把多余的錢交給我，這樣我們兩個都會感到快樂了!

10、新年祝福語：今年過節(jié)不收禮，其實給點(diǎn)也可以。十塊八塊不嫌棄，十萬八萬過得去.你要真是沒的送，短信一條也可以。新年快樂!

11、新年祝福語：一直很想跟你說，但不知你會不會覺得我太心急。我又怕被別人搶先一步，所以我決定鼓起勇氣告訴你：新年快樂!

12、新年祝福語：祝您在新年的假期里：小酒喝到六親不認(rèn)，香煙抽到同歸于盡，麻將搓到晝夜不分，跳舞跳到筋疲力盡，吹牛吹到自己不信。

13、新年祝福語：聽說過年你要到我們家做客，我弟弟會代我去接你，為便于確認(rèn)身份，請你左手拿兩條上等煙，右手提兩瓶茅臺酒。

14、新年祝福語：祝你正財、偏財、橫財，財源滾滾;親情、友情、私情，情情如意;官運(yùn)、財運(yùn)、桃花運(yùn)，運(yùn)運(yùn)亨通。

15、新年祝福語：酒越久越醇，朋友相交越久越真;水越流越清，世間滄桑越流越淡。祝新年快樂，時時好心情!

16、新年祝福語：對你的思念象裊裊的輕煙不絕如縷，對你的祝福是潺潺的小溪叮咚作響?；蛟S歲月將往事褪色，或許空間將彼此隔離。但值得珍惜的依然是你給我的情誼。再次對你說聲：新年快樂!

17、新年祝福語：愿你抱著平安，擁著健康，揣著幸福，攜著快樂，摟著溫馨，帶著甜蜜，牽著財運(yùn)，拽著吉祥，邁入新年，快樂度過每一天!

18、新年祝福語：愿所有的好夢依偎著你，入睡是甜，醒來成真!愿所有的財運(yùn)籠罩著你!日出遇貴，日落見財!愿所有的吉星呵護(hù)著你!時時吉祥!刻刻平安!

19、新年祝福語：送你一件外套，前面是平安，后面是幸福，吉祥是領(lǐng)子，如意是袖子，快樂是扣子，口袋里滿是溫暖，穿上吧，讓它相伴你的每一天!新年快樂!

20、新年祝福語：零時的鐘聲響徹天涯，新年的列車準(zhǔn)時出發(fā).它馱去難忘的歲月，迎來了又一輪火紅的年華.祝你新年快樂，鵬程萬里!

21、新年祝福語：層層往事在歲月沉淀，留下無盡回憶，親情讓我感到幸福無限。謝謝爸媽給我生命，給我快樂，給了我又一個嶄新的一年。

22、新年祝福語：愛人，你在我記憶的畫屏上增添了許多美好的懷念，似錦如織!請接受我深深的祝愿吧，愿所有的歡樂永遠(yuǎn)伴隨你!新年快樂!

23、新年祝福語：相聚的日子都只為醞一杯濃酒，釀流動相思，在新年的鞭炮聲中凝視你如此迷人的面龐，只想對你說：愛你一萬年!

24、新年祝福語：遠(yuǎn)方的你是否無恙?在遙遠(yuǎn)的思念里，改變的是我的容顏，不變的是永遠(yuǎn)愛你的心!愛人，真心愿你新年快樂!

25、新年祝福語：日出+日落=朝朝暮暮，月亮+星星=無限思念，風(fēng)花+雪月=柔情蜜意，流星+心語=祝福萬千，祝你有個快樂的新年!

26、新年祝福語：我最親愛的朋友：在新年來臨之際，祝愿上帝保佑您!觀音菩薩護(hù)住您!財神抱住您!愛神射住您!食神吻住您!

27、新年祝福語：我把新世紀(jì)的祝福和希望，悄悄地放在將融的雪被下，讓它們沿著春天的秧苗生長，送給你滿年的豐碩與芬芳!

感人肺腑范文第5篇

【關(guān)鍵詞】 人胚胎肺;間充質(zhì)干細(xì)胞; 放射性肺炎

放射性肺損傷是最為常見和嚴(yán)重的胸部放療并發(fā)癥之一，其高發(fā)病率限制了腫瘤的放療劑量，從而使腫瘤治療療效下降，部分重度放射性肺損傷明顯增加了患者的死亡風(fēng)險。因此積極尋找能夠預(yù)防、逆轉(zhuǎn)和治療放射性肺損傷并且副作用小的治療方法成為非常重要的課題。人們在許多組織和器官中都發(fā)現(xiàn)和分離了具有多分化潛能的相應(yīng)干細(xì)胞，但在肺組織證實和分離肺干細(xì)胞的研究進(jìn)展緩慢，呼吸道黏膜上皮及肺泡上皮細(xì)胞終生不斷自我更新，尤其在肺組織嚴(yán)重?fù)p傷以后，上皮更新，促進(jìn)創(chuàng)傷修復(fù)，在理論上肯定存在多能干細(xì)胞，人們用同位素標(biāo)記的方法取得了一些肺干細(xì)胞存在的證據(jù)，肺泡上皮Ⅱ型細(xì)胞中可能存在具有干細(xì)胞特征的細(xì)胞類型。本研究通過對人胚肺MSC分離、傳代培養(yǎng)、生物學(xué)特性及多向分化能力的測定，明確了人胚肺MSC的干細(xì)胞特性。通過動物體內(nèi)實驗及體外細(xì)胞培養(yǎng)試驗，證實了人胚肺MSC能有效促進(jìn)肺泡上皮細(xì)胞的生長，且能對放射性損傷后肺上皮細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)〔1，2〕。

1 材料與方法

1.1 MSC的分離和培養(yǎng) 選取15例水囊引產(chǎn)胎兒，胎齡為3～5個月。取胎兒肺臟，用DHanks液反復(fù)沖洗，剪成碎塊，用0.2% Ⅱ型膠原酶(Sigma)消化，37℃、30 min，過100目鋼網(wǎng)，制成單細(xì)胞懸液，細(xì)胞密度為2×106/ml，用含DMEM/F12，MCDB201，2% FCS(Gibco BRL公司)培養(yǎng)液，置37℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，3 d后換液，棄去非貼壁的細(xì)胞，以后每3天半量換液。當(dāng)細(xì)胞達(dá)80%～90%融合時，0.25%胰酶(Sigma)常規(guī)消化傳代。

1.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及細(xì)胞周期的測定

1.2.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察 取1～7代MSC，置于有小玻片的3.5cm直徑平皿中，37℃，飽和濕度，5% CO2培養(yǎng)12 d后取出，空氣風(fēng)干，瑞士染色，油鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。

1.2.2 細(xì)胞周期的測定 MSC細(xì)胞周期分析的主要試劑：RNA酶I(TaKaRa)，碘化丙啶(PI，Sigma)。將胎兒MSC消化，70%冷乙醇4℃固定30 min，PBS液洗滌細(xì)胞2遍，5 μg/ml I染色(室溫，5 min)，用流式細(xì)胞儀(FACSVantage型)檢測，Mod FIT軟件分析結(jié)果。用流式細(xì)胞儀測定第11、15代MSC的DNA含量，可見處于G0/G1期的細(xì)胞多，分別為95.34%、95.68%，S期少，分別為4.13%、3.58%。

1.3 免疫組化及PTPCR方法檢測人胚肺MSC向成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化能力

1.3.1 人胚肺MSC的一般生物學(xué)特性 單個核細(xì)胞培養(yǎng)48～72 h后，在鏡下可見散在的貼壁細(xì)胞，呈典型紡錘樣成纖維細(xì)胞狀，7～10 d形成放射狀克隆，挑出20個克隆分別培養(yǎng)，約1 w形成致密的貼壁細(xì)胞層，細(xì)胞形態(tài)均一，生長速度快，易被胰酶消化，可傳至17代以上，其形態(tài)及生長特點(diǎn)不發(fā)生明顯改變。以下描述中將此類細(xì)胞稱為人胚肺貼壁細(xì)胞(fetal lungderived adherent cell，F(xiàn)LAC)，見圖1。

1.3.2 MSC多系誘導(dǎo)分化的鑒定 FLAC在成脂肪誘導(dǎo)體系中培養(yǎng)3 d，細(xì)胞由成纖維細(xì)胞樣逐漸收縮變短，成為立方形或多角形。連續(xù)培養(yǎng)7 d，鏡下可見細(xì)胞內(nèi)有微小脂滴出現(xiàn)，隨著時間的延長，脂滴逐漸增大融合。培養(yǎng)2 w時，可見融合成團(tuán)的脂滴充滿整個細(xì)胞，誘導(dǎo)2周期后用油紅O染色，可見細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的脂肪被特異的染成紅色，見圖2B。上述細(xì)胞同時表達(dá)脂肪細(xì)胞特異性的PPARγ2。成骨培養(yǎng)中細(xì)胞形態(tài)由原來的梭形變成了立方形，隨著細(xì)胞生長密度的增長形成多層的結(jié)節(jié)結(jié)構(gòu)，而對照中細(xì)胞仍是梭形且呈單層生長;80%～90%的細(xì)胞呈Apase陽性，而對照中的Apase陽性細(xì)胞較少;von Kossa染色發(fā)現(xiàn)在成骨培養(yǎng)有明顯的鈣化基質(zhì)沉積，而對照中未見到此現(xiàn)象;RTPCR分析表明MSC經(jīng)OS誘導(dǎo)分化培養(yǎng)后表達(dá)骨鈣蛋白基因，見圖2C。

1.4 放射性肺炎肺泡上皮細(xì)胞的培養(yǎng) 2BS細(xì)胞條件培養(yǎng)液的獲取：(1)條件培養(yǎng)基1的制備：2BS細(xì)胞培養(yǎng)至當(dāng)細(xì)胞生長融合達(dá)90%時，給予換液，24 h后無菌條件下取其上清，過濾細(xì)胞碎片后備用。(2)條件培養(yǎng)基2的制備：2BS細(xì)胞培養(yǎng)至當(dāng)細(xì)胞生長融合達(dá)90%時，給予換液，同時取C57BL/6小鼠全肺用6MVX線直線加速器進(jìn)行單次照射13 Gy后單個肺細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，24 h后取上清，過濾細(xì)胞碎片后備用。

1.5 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)體外測定人胚肺MSC修復(fù)放射損傷肺組織的能力，對比檢測實驗及對照組TGFβ1的含量

1.5.1 實驗動物和飼養(yǎng)環(huán)境 健康雌性 C57BL/6 小鼠40只，體重(200±20)g，由上海實驗動物研究中心提供，飼養(yǎng)于SPF級大鼠飼養(yǎng)室，受試前籠養(yǎng)7 d以適應(yīng)環(huán)境。

1.5.2 試劑及儀器 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒，為博士德公司產(chǎn)品。SIEMENS PRIMUS KP2型直線加速器由德國西門子公司生產(chǎn)。

1.5.3 動物分組 在照射前1 w將40只雌性，C57BL/6 小鼠，隨機(jī)分作隨機(jī)分為空白組、模型組、實驗組1，實驗組2，每組動物均為10只。

1.5.4 模型建立及實驗方法 空白組：不做任何處理;其余3組均用6MVX線直線加速器進(jìn)行全肺單次照射13 Gy;實驗組1照射后每3日給予尾靜脈注射條件培養(yǎng)液1約0.3 ml;實驗組2照射后每3日給予尾靜脈注射條件培養(yǎng)液2約0.3 ml。

1.5.5 標(biāo)本收集及處理 照射后4 w，每組各隨機(jī)取5只小鼠活體取材。腹腔注射2%戊巴比妥鈉0.12 ml/100 g，將大鼠麻醉后，分別取4 ml腹主動脈血用ELISA方法檢測血清中TGFβ1的水平;將右上肺組織固定于10%緩沖性甲醛液中，常規(guī)制成石蠟切片備用，HE染色后光鏡觀察病理改變。

2 結(jié) 果

2.1 光鏡下觀察組織病理改變 與空白組小鼠比較，模型組小鼠的肺組織照射后存在明顯的病理組織學(xué)改變，早期以急性炎癥反應(yīng)為主，表現(xiàn)為肺充血、水腫、肺間質(zhì)增厚，見圖3A;實驗組1的病理與單純照射組小鼠相似，存在明顯的炎癥反應(yīng)，肺充血、水腫明顯，且肺泡腔內(nèi)可見明顯滲出液，提示炎癥反應(yīng)較重，見圖3B。實驗組2的病理表現(xiàn)則與正常組小鼠接近，炎癥反應(yīng)較輕，僅表現(xiàn)為輕度肺充血，見圖3C。

2.2 照射后各組大鼠血清TGFβ1水平 照射后4 w開始，實驗組1及模型組小鼠血清TGFβ1濃度明顯增高〔(30.25±6.33) ng/ml vs (16.95±2.47) ng/ml〕，實驗組1尤為明顯(P

3 討 論

現(xiàn)階段研究表明，放射性肺炎所致的肺組織損傷不僅僅是單一靶細(xì)胞損傷的結(jié)果，而且是一個有多種細(xì)胞參與、有多種細(xì)胞因子調(diào)控的復(fù)雜過程〔3〕。放射線致使肺泡Ⅱ型細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞受損〔4〕，急性期表現(xiàn)為肺血管特別是毛細(xì)血管損傷，產(chǎn)生充血、水腫和細(xì)胞浸潤，急性改變有可能自行消散，但常引起肺結(jié)締組織增生和纖維化。其中肺組織病理改變是反映肺炎程度的最直觀指標(biāo)，可判斷肺炎的程度，同時也可以篩選預(yù)防與治療的藥物。基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)，放射性肺損傷可引起肺內(nèi)效應(yīng)細(xì)胞即肺泡巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放多種細(xì)胞因子，介導(dǎo)炎性反應(yīng)，啟動和促進(jìn)肺組織纖維化。其中TGFβ1較為重要，是諸多參與放射性肺損傷因子中頗受關(guān)注的細(xì)胞因子，能夠?qū)⑸镄?yīng)擴(kuò)大，參與放射性肺損傷的發(fā)生與發(fā)展〔4〕。

近年來，干細(xì)胞的研究引起了人們的極大關(guān)注，而成體干細(xì)胞的可塑性研究是干細(xì)胞研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一，其中發(fā)現(xiàn)最早并且研究最多的是骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)。BMSCs是來源于中胚層的一類多能干細(xì)胞，在不同誘導(dǎo)條件下具有向心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)元及肺泡上皮細(xì)胞等分化的多項潛能〔5～7〕。BMSCs可取自自體骨髓，取材方便且體外易于分離培養(yǎng)，對機(jī)體損傷小，免疫原性弱，組織相容性好，這為移植BMSCs替代治療受損組織提供了可能。

放射性肺炎與多種細(xì)胞、生長因子的激活和相互作用有關(guān)。有文獻(xiàn)報道〔8〕，小鼠肺部接受照射后1 d，肺組織中即可出現(xiàn)TGFβ基因和Ⅰ型膠原基因的表達(dá)增多;照射后14 d，其表達(dá)量為第1天的5倍。研究表明，發(fā)生放射性肺損傷患者的血清TGFβ1含量也持續(xù)升高〔9〕，提示血清TGFβ1可作為放射性肺損傷的預(yù)測因子，并且可通過降低血清TGFβ1濃度來減輕肺組織的損傷。本實驗顯示，在照射后初期，小鼠血清TGFβ1濃度就顯著增高，而人胚肺MSC卻能使血清TGFβ1濃度持續(xù)下降，起到減輕放射性肺炎的作用。本研究發(fā)現(xiàn)放射性肺炎是在各種靶細(xì)胞和TGFβ1等細(xì)胞因子的共同作用下相互影響、相互調(diào)節(jié)的。人胚肺MSC可能通過下調(diào)TGFβ1的表達(dá)對急性放射性肺炎起到一定的防治作用，可為臨床提供有關(guān)放射性肺炎治療的新的生物治療方法。

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